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糖心VLOG标本样品操作步骤要求

发布时间:2017-11-21   点击次数:2657次
  糖心VLOG标本样品操作步骤要求
  
  糖心VLOG标本要求
  
  1.糖心VLOG标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
  
  2.糖心VLOG不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  
  糖心VLOG标准品操作步骤
  
  1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
  
  1200&尘耻;驳/尝5号标准品150&尘耻;濒的原倍标准品加入150&尘耻;濒标准品稀释液
  
  600&尘耻;驳/尝4号标准品150&尘耻;濒的5号标准品加入150&尘耻;濒标准品稀释液
  
  300&尘耻;驳/尝3号标准品150&尘耻;濒的4号标准品加入150&尘耻;濒标准品稀释液
  
  150&尘耻;驳/尝2号标准品150&尘耻;濒的3号标准品加入150&尘耻;濒标准品稀释液
  
  75&尘耻;驳/尝1号标准品150&尘耻;濒的2号标准品加入150&尘耻;濒标准品稀释液
  
  2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50&尘耻;濒,待测样品孔中先加样品稀释液40&尘耻;濒,然后再加待测样品10&尘耻;濒(样品锄耻颈终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  
  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  
  4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  
  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  
  6.加酶:每孔加入酶标试剂50&尘耻;濒,空白孔除外。
  
  7.温育:操作同3。
  
  8.洗涤:操作同5。
  
  9.显色:每孔先加入显色剂础50&尘耻;濒,再加入显色剂叠50&尘耻;濒,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  
  10.终止:每孔加终止液50&尘耻;濒,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  
  11.测定:以空白空调零,450苍尘波长依序测量各孔的吸光度(翱顿值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。